№AN150DOG, Ретикулоциты собак, ручной подсчет

Подготовка к проведению анализа

Традиционно принято рекомендовать голодную диету за 4-6 часов до взятия анализа. На практике только некоторые параметры могут изменяться в зависимости от времени, прошедшего с момента приема пищи, и врач может учесть этот дополнительный фактор. Тем не менее если есть возможность сдать анализ натощак — лучше сдать его натощак. Водопотребление не ограничивается. Других рекомендаций по подготовке для сдачи стандартного анализа обычно нет.

Кровь у собак берется из любой из конечностей (используются подкожная вена предплечья и латеральная, или малая, вена сафена на латеральной стороне голени, бедренная вена, хотя в случае затруднений могут использованы и другие поверхностные вены). Для биохимического анализа крови используется пробирка, не содержащая антикоагулянт, или пробирка с активатором свертывания, так как требуется сыворотка, а не цельная кровь.

Клинический анализ крови у животных. Расшифровка

Расшифровка клинического анализа крови у животных может быть проведена на основе следующих сведений:

Гематокрит (Htc) – объемная фракция эритроцитов в крови Норма (%) — кошка 30-51; собака 37-55.

Повышение данного показателя может свидетельствовать об эритроцитозе (повышение количества эритроцитов), дегидратации (это различные заболевания ЖКТ, а также диабет) или снижении объема циркулирующей плазмы (характерно для перитонита и ожоговой болезни).

Снижение гематокрита говорит о выраженной анемии, повышении объема циркулирующей плазмы (наблюдается при сердечной или почечной недостаточности, геперпротеинемии). Низкий гематокрит также характерен для хронических воспалительных процессов, травм, голодания, хронической гиперазотемии, онкологических заболеваний.

Эритроциты (RBC) — форменные элементы крови, содержащие гемоглобин.

Норма (х 1012/л) — кошка 5,2-10,8; собака 5,4-8,0.

Повышение эритроцитов в крови может быть вызвано первичным эритроцитозом (усилением выработки эритроцитов). Также это состояние может быть вызвано реактивными эритроцитозами (вследствие вентиляционной недостаточности при бронхолегочной патологии и при пороке сердца). Не исключены и вторичные эритроцитозы, вызванные увеличением продукции эритропоэтинов (при гидронефрозе и поликистозе почек, а также при наличии новообразований почек и печени).

Понижение эритроцитов может свидетельствовать о различных анемиях (железодефицитной, гемолитической, гипопластической, B12-дефицитной). Это состояние характерно при острой кровопотере, поздних сроках беременности, хронических воспалительных процессах, гипергидратации.

Средний объем эритроцита (MCV) — характеризует тип анемии

Норма (мкм3) — кошка 41-51; собака 62-74.

Повышение MCV наблюдается при макроцитарных и мегалобластических анемиях, а также при анемиях, могущих сопровождаться макроцитозом (гемолитических).

При нормальных показателях могут наблюдаться нормоцитарные анемии (апластическая, гемолитическая, кровепотери, гемоглобинопатии), а также анемии, сопровождающиеся нормоцитозом (регенераторная фаза железодефицитной анемии, миелодиспластические синдромы).

Снижение показателя MCV характерно для микроцитарных анемий (железодефицитной, сидеробластической, талассемии) и анемий, могущих сопровождаться микроцитозом (гемолитическая, гемоглобинопатия). Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) — неспецифический показатель диспротеинемии, сопровождающей процесс болезни. Норма (мм/час) — кошка 1-6; собака 2-6.

Увеличение СОЭ характерно для любых воспалительных процессов, сопровождающихся накоплением в крови фибриногена, a- и b- глобулинов. Также СОЭ увеличивается при заболеваниях, сопровождающихся распадом тканей (инфаркты, злокачественные новообразования и т. д.), интоксикациях и отравлениях, болезнях обмена веществ (при сахарном диабете), болезнях почек, сопровождаемым нефротическим синдромом (гиперальбуминемией), заболеваниях печени, ведущих к выраженной диспротеинемии, при беременности, шоках, травмах и оперативных вмешательствах.

Наиболее сильные повышения СОЭ (более 50-80 мм/час) характерны для миеломной болезни, злокачественных новообразований, заболеваний соединительной ткани и системных васкулитов.

Снижение СОЭ характеризуется гемолитической анемией.

Тромбоциты

Норма (х 109/л) — кошка 200-600; собака 160-500.

Повышение уровня тромбоцитов свидетельствует об инфекциях, воспалениях, неоплазии.

Снижение характерно для уремии, токсемии, гипоадренокортицизма, иммунных расстройств, кровотечений.

Гемоглобин (HGB) — кровяной пигмент, содержащийся в эритроцитах. Основная функция — перенос кислорода и углекислого газа.

Норма (г/л) — кошка 90-170; собака 120-170.

Повышение гемоглобина свидетельствует о первичных или вторичных эритроцитозах, а также относительном эритроцитозе при дегидратации.

Снижение характерно при анемиях (железодефицитной, гемолитической, гипопластической, B12-фолиеводефицитной), острых кровопотерях, скрытых кровотечениях, эндогенной интоксикации (злокачественные опухоли и их метастазы), поражении костного мозга, почек и некоторых других органов.

Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC) — определяет насыщенность эритроцитов гемоглобином.

Норма (г/дл) — кошка 31-35; собака 32-36.

Повышение характерно для гиперхромных анемий (сфероцитоз и овалоцитоз).

Снижение показателя сопровождает гипохромные анемии (железодефицитную, сферобластическую и талассемию). Среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH) — используется для характеристик анемии. Норма (пг) — кошка 13-18; собака 22-28.

Повышение характерно для гиперхромных анемий (мегалобластических, цирроза печени).

Снижение может свидетельствовать о гипохромных анемиях (железодефицитной) и анемиях при злокачественных опухолях.

Только специалист, ветеринарный врач, может учесть все нюансы данных клинического анализа крови. Важен комплексный подход в диагностике заболевания. Безусловно, необходим осмотр животного, опрос хозяина о протекании заболевания; аппаратная диагностика: УЗИ, рентген, ЭКГ; другие анализы, например, при необходимости: анализ мочи, кала, биохимический анализ крови. Только тогда снижается риск ошибки, и врач имеет все возможности для постановки правильного диагноза, а, значит, и назначении соответствующего, эффективного лечения.

№AN150DOG, Ретикулоциты собак, ручной подсчет

Определение количества ретикулоцитов используется при наличии анемии. Скорость высвобождения ретикулоцитов из костного мозга является лучшим показателем функции эритроидного компонента костного мозга.

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

Ретикулоциты – незрелые безъядерные эритроциты млекопитающих, которые содержат остаточные РНК и митохондрии, агрегированные в форме гранулярной сетчатой структуры (ретикулума) и выявляемые при использовании метода суправитального окрашивания метиленовым синим (окраска живых клеток). При созревании эритроцитов эта ретикулярная сеть исчезает. Высвобождение ретикулоцитов из костного мозга происходит в ответ на анемию. В зависимости от содержания остаточного количества рибосом и, соответственно, зрелости клеток выделяют два вида ретикулоцитов: агрегатные и зернистые (пунктатные). Агрегатные ретикулоциты циркулируют в крови в течение короткого промежутка времени (около 12 часов), прежде чем превратятся в зернистые (пунктатные) ретикулоциты, которые затем (через 10 дней) преобразовываются в зрелые эритроциты. Количество зернистых (пунктатных) и агрегатных ретикулоцитов возрастает с увеличением интенсивности эритропоэза. Поскольку зернистые ретикулоциты циркулируют в течение нескольких недель и сохраняются после того, как уровень агрегатных ретикулоцитов вернется в пределы референсных значений, их подсчет не имеет большого клинического значения при оценке текущего регенераторного ответа. Присутствие зернистых ретикулоцитов указывает на реакцию костного мозга на анемию, имевшую место примерно три недели назад.

При исследовании ретикулоцитов определяется процент ретикулоцитов путем пересчета на 1000 зрелых эритроцитов. При использовании этого показателя возможна некорректная оценка ответа костного мозга, потому как:

1. Ретикулоциты, высвобождаемые из костного мозга в кровь у животных при анемии, смешиваются с меньшим количеством зрелых эритроцитов. Таким образом, в результате происходит завышение процента ретикулоцитов.
2. Менее зрелые формы ретикулоцитов выходят в кровяное русло в ответ на анемию раньше (сдвиг ретикулоцитов). Эти ретикулоциты дольше сохраняются в крови потому, что им требуется больше времени для созревания, что приводит к завышению процента ретикулоцитов.

Скорректированный процент ретикулоцитов. При его расчете учитывается величина гематокрита. Вносимая корректировка актуальна только в случае, указанном в пункте 1, но не в случае, указанном в пункте 2. Скорректированный процент ретикулоцитов больше чем 1% у собак и 0,4% у кошек указывает на стимуляцию костного мозга в ответ на анемическое состояние. Скорректированный процент ретикулоцитов не был подтвержден для использования у других видов животных.

Абсолютное число ретикулоцитов. Этот параметр вносит коррективы в случае, описанном в пункте 1 (выше), но не корректирует эффект, описанный в пункте 2. Получение абсолютного числа ретикулоцитов больше чем 80х109/л у собак и более 60х109/л у кошек указывает на регенеративный ответ (регенераторную анемию), и что причиной анемии являются внешние воздействия на костный мозг (т. е. кровотечение или гемолиз). В зависимости от снижения гематокрита или при очень низком гематокрите должно иметь место пропорционально более высокое абсолютное число ретикулоцитов.

Ретикулоцитарный индекс. Этот поправочный коэффициент используется для человека, но также был применен у собак и кошек для корректировки пунктов 1 и 2 (см. выше). Значимость этого параметра остается спорной, поскольку отсутствуют данные, подтверждающие успешное его использование у животных.

В крови здоровых собак может содержаться небольшое количество ретикулоцитов (до 1%). У собак все ретикулоциты агрегатные, т. е. они больше, чем зрелые эритроциты, и содержат большие глыбки агрегированных рибосом. Ретикулоцитоз у кошек менее выражен, чем у собак. У кошек выделяют две формы ретикулоцитов: зернистые (пунктатные) и агрегатные. Зернистые ретикулоциты более зрелые, чем агрегатные, и близки по размерам к созревшим эритроцитам. Они содержат от двух до шести мелких включений гранулярно-нитчатой субстанции остаточной РНК. У здоровых кошек может насчитываться до 10% зернистых (пунктатных) ретикулоцитов. После эпизода разрушения эритроцитов, возрастание числа зернистых (пунктатных) ретикулоцитов происходит через одну неделю, пик роста приходится на 2-3 неделю, затем их число постепенно снижается. Таким образом, увеличение зернистых (пунктатных) ретикулоцитов указывает на стимуляцию регенераторного ответа, произошедшую за 2-4 недели до этого, в то время как увеличение агрегатных ретикулоцитов указывает на недавнюю стимуляцию костного мозга. Увеличение числа агрегатных ретикулоцитов свидетельствует о текущей активности костного мозга в ответ на анемию (т. е. увеличение интенсивности эритропоэза или регенерации). Определение количества агрегатных ретикулоцитов является наиболее полезным при оценке реакции костного мозга при анемии, при этом зернистые (пунктатные) ретикулоциты обычно не подсчитываются (они считаются зрелыми клетками). Тем не менее, при легкой степени анемии подсчет пунктатных ретикулоцитов является полезным, поскольку обычно происходит сохранение агрегированных ретикулоцитов в костном мозге до их созревания в зернистые (пунктатные).

Отсутствие ретикулоцитов после развития анемии позволяет предположить отсутствие адекватной реакции костного мозга (нерегенеративную анемию). Это может наблюдаться при нехватке времени для развития ретикулоцитоза, недостаточности ретикулоцитарного ответа или нарушении эритропоэза.

Сроки исполнения: 1 день (плюс 1-2 дня для регионов).

Исследуемый аналит: цельная кровь.

Метод исследования: микроскопия мазка (суправитальный метод окраски ретикулоцитов ).

Подготовка пациента: перед проведением исследования животное должно быть выдержано на голодной диете минимум 12 часов.

Показания:

• установить, что является причиной появления изменений: снижение образования эритроцитов или повышенное разрушение или потеря эритроцитов.
• Оценить ответ эритроидного ростка костного мозга (т.е. подтвердить наличие или отсутствие регенераторного ответа на анемию).

Противопоказания: неизвестны.

Метод отбора биоматериала: венепункция.

Преаналитика: взятие крови — пробирка с розовой крышкой (с ЭДТА) 0,5 мл; для крупных собак можно использовать пробирку с сиреневой крышкой (с ЭДТА) 2 мл. Заполнить пробирку кровью СТРОГО до отметки на этикетке. Осторожно перевернуть пробирку 7-10 раз для перемешивания крови с антикоагулянтом. Стабильность пробы: 3 дня при +2°С…+8°С. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.

Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).

Интерпретация результата: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

В крови здорового животного ретикулоциты отсутствуют или присутствуют в незначительном количестве менее 1,5%. До 48 часов после острого кровотечения или гемолиза увеличение числа ретикулоцитов бывает не столь заметным, максимальное увеличение наблюдается на 4-7-ой день. Развитие ретикулоцитоза может быть отсрочено у животных с различными системными заболеваниями и у пожилых животных. При регенеративной анемии в условиях адекватного функционирования костного мозга величина ретикулоцитарного ответа должна соответствовать степени тяжести анемии (чем тяжелее анемия и ниже гематокрит, тем сильнее ретикулоцитарный ответ). Гемолитические анемии обычно приводят к более заметному ретикулоцитозу, чем постгеморрагические анемии. Железо из разрушенных эритроцитов более легкодоступно для эритропоэза, чем железо, которое хранится в виде гемосидерина.

Количество ретикулоцитов должно интерпретироваться с учетом степени анемии. Предпочтительнее пользоваться показателем абсолютного числа ретикулоцитов (АЧР), чем процентом ретикулоцитов, так как на показатель АЧР не влияют изменения общего количества эритроцитов. У животных при легкой и тяжелой степени анемии в крови циркулирует одинаковое абсолютное число ретикулоцитов, но процент ретикулоцитов выше при тяжелой анемии, поскольку в крови меньше зрелых клеток. Это может дать ложное впечатление о том, что тяжелая анемия имеет более регенеративный характер, чем умеренная анемия. В качестве альтернативы можно использовать показатель скорректированного процента ретикулоцитов. Иногда для собак используют расчетный ретикулоцитарный индекс. С увеличением тяжести анемии ретикулоциты проводят меньше времени в костном мозге, выходят менее созревшими и дольше находятся в крови до созревания в эритроциты. Это означает, что скорректированный процент ретикулоцитов и абсолютное количество ретикулоцитов могут переоценивать степень активности эритропоэза в костном мозге. Однако ретикулоцитарный индекс не является достоверным у собак и кошек, поскольку в формуле для его расчета используются данные о времени созревания эритроцитов человека, а для животных такие временные характеристики пока неизвестны. Поэтому для животных этот показатель редко рассчитывается с предпочтением подсчета абсолютного количества ретикулоцитов.

Единицы измерения: Абсолютное число ретикулоцитов – клеток /мкл.

Референсные значения:

• 60000-80000-физиологическая
• регенерация(угнетение у пациента с анемией)
• 80000-150000-легкая регенерация
• 150000-300000-умеренная регенерация
• 300000-500000-выраженная регенерация
• >500000-значительно выраженная.

Повышение показателя при анемии (регенеративная анемия):

• Острая потеря крови.
• Гемолиз.
• Токсическое действие цинка или меди.
• Фрагментация эритроцитов (ДВС-синдром, неоплазия, инвазии кровепаразитов).
• Действие змеиного яда.

Понижение показателя при анемии (нерегенеративная анемия):

• Острая кровопотеря или гемолиз (длительностью менее 1-2 дней), когда костный мозг еще не успел отреагировать.
• Анемия хронических заболеваний.
• Недостаточный синтез эритропоэтина (хроническая болезнь почек).
• Эндокринопатии (в том числе гипотиреоз).
• Дефицит железа (как правило, вторичный по отношению к хроническому наружному кровотечению и обычно выявляемым микроцитозом).
• Заболевания костного мозга (снижение способности синтеза).
• Инфекционные заболевания (парвовироз, эрлихиоз и др.).
• Миелофтиз.
• Токсическое повреждение костного мозга.
• Истинная эритроцитарная аплазия.
• Миелопролиферативные или миелодиспластические заболевания.
• Дефицит питательных веществ (редко).

Какие породы более подвержены

Тромбоцитопения может быть диагностирована у любой собаки или кошки, независимо от возраста и пола. Однако существует породы собак, предрасположенные к первичной форме тромбоцитопении, причиной которой является сбой иммунной системы. К таким породам относятся кокер спаниели, немецкие овчарки, пудели. От вторичной тромбоцитопении чаще других страдают доберманы.

Диагностика в ветклинике

Поскольку симптомы тромбоцитопении нехарактерны, постановка диагноза на основании анамнеза и визуального осмотра животного невозможна. Ветеринару требуется провести ряд необходимых диагностических исследований, основной из которых — полный анализ крови.

С помощью данного вида исследования врач получает информацию о том, сколько тромбоцитов содержится в крови, результат сверяется с нормальными показателями.

Не менее важна проба на свертываемость крови, показывающая время формирования тромба.

К дополнительным способам диагностики тромбоцитопении относятся:

• анализы кала и мочи;
• анализы на выявление сердечного гельминтоза и прочих паразитарных патологий;
• серологическое исследование,
• иммунологический метод,
• коагулограмма,
• анализ на обнаружение собственных антител к тромбоцитам,
• тест Кумбса (для определения неполных антиэритроцитарных антител).

Для определения состояния печени и селезенки показаны УЗИ и рентгенография. В некоторых случаях требуется забор аспирата костного мозга.